Elektrophorese: Was es ist, wofür es ist und wie es gemacht wird

Inhalt

• Wofür ist das
• Wie es gemacht wird
• Arten der Elektrophorese
• 1. Hämoglobinelektrophorese
• 2. Proteinelektrophorese

Die Elektrophorese ist eine Labortechnik, die mit dem Ziel durchgeführt wird, Moleküle nach ihrer Größe und elektrischen Ladung zu trennen, damit die Diagnose von Krankheiten gestellt, die Proteinexpression verifiziert oder Mikroorganismen identifiziert werden können.

Die Elektrophorese ist ein einfaches und kostengünstiges Verfahren, das im Labor und in Forschungsprojekten eingesetzt wird. Je nach Zweck der Elektrophorese kann es beispielsweise erforderlich sein, andere Tests und Untersuchungen durchzuführen, um eine Diagnose zu erhalten.

Wofür ist das

Die Elektrophorese kann sowohl in Forschungsprojekten als auch in der Diagnose für verschiedene Zwecke durchgeführt werden, da es sich um eine einfache und kostengünstige Technik handelt.Somit kann eine Elektrophorese durchgeführt werden, um:

• Identifizieren Sie Viren, Pilze, Bakterien und Parasiten, wobei diese Anwendung in Forschungsprojekten häufiger vorkommt.
• Vaterschaftstest;
• Überprüfen Sie die Expression von Proteinen;
• Identifizieren Sie Mutationen, die beispielsweise bei der Diagnose von Leukämie hilfreich sind.
• Analyse der Arten von zirkulierendem Hämoglobin, die bei der Diagnose von Sichelzellenanämie hilfreich sind;
• Bewerten Sie die Menge der im Blut vorhandenen Proteine.

Je nach Zweck der Elektrophorese kann es erforderlich sein, weitere ergänzende Tests für den Arzt durchzuführen, um die Diagnose abzuschließen.

Wie es gemacht wird

Zur Durchführung der Elektrophorese wird das Gel benötigt, das je nach Verwendungszweck Polyacrylamid oder Agarose, Elektrophoresepuffer und -behälter, Molekulargewichtsmarker und ein fluoreszierender Farbstoff sein kann, zusätzlich zu einer UV- oder LED-Lichtausrüstung, die auch als Transilluminator bekannt ist.

Nach der Herstellung des Gels muss ein bestimmtes Objekt platziert werden, damit die Vertiefungen im Gel, im Volksmund Kamm genannt, hergestellt werden, und das Gel aushärten lassen. Wenn das Gel fertig ist, tragen Sie die Substanzen einfach auf die Vertiefungen auf. Dazu muss ein Molekulargewichtsmarker in eine der Vertiefungen gegeben werden, eine Positivkontrolle, bei der es sich um die Substanz handelt, die bekannt ist, eine Negativkontrolle, die die Gültigkeit der Reaktion garantiert, und die zu analysierenden Proben. Alle Proben müssen mit einem fluoreszierenden Farbstoff gemischt werden, da auf diese Weise die Banden auf dem Transilluminator sichtbar gemacht werden können.

Das Gel mit den Proben muss in den Elektrophoresebehälter gegeben werden, der die spezifische Pufferlösung enthält, und dann wird das Gerät eingeschaltet, so dass elektrischer Strom und folglich eine Potentialdifferenz vorhanden sind, die für die Trennpartikel entsprechend ihrer Bedeutung wichtig ist Last und Größe. Die elektrophoretische Laufzeit variiert je nach Ziel des Verfahrens und kann bis zu 1 Stunde dauern.

Nach der angegebenen Zeit ist es möglich, das Ergebnis des elektrophoretischen Laufs durch den Transilluminator anzuzeigen. Wenn das Gel unter UV- oder LED-Licht gesetzt wird, kann das Bandenmuster sichtbar gemacht werden: Je größer das Molekül ist, desto kleiner ist seine Migration und nähert sich der Vertiefung. Je leichter das Molekül ist, desto größer ist das Migrationspotential.

Damit die Reaktion validiert werden kann, müssen die Banden der Positivkontrolle sichtbar gemacht werden, und in der Negativkontrolle darf nichts sichtbar gemacht werden, da dies sonst ein Hinweis darauf ist, dass eine Kontamination vorliegt, und der gesamte Vorgang muss wiederholt werden.

Arten der Elektrophorese

Die Elektrophorese kann für verschiedene Zwecke durchgeführt werden, und je nach Zweck können verschiedene Arten von Gelen verwendet werden, wobei Polyacrylamid und Agarose am häufigsten sind.

Die Elektrophorese zur Identifizierung von Mikroorganismen wird häufiger in Forschungslabors durchgeführt. Zu diagnostischen Zwecken kann die Elektrophorese jedoch zur Identifizierung von hämatologischen Erkrankungen und Krankheiten verwendet werden, die sich mit zunehmender Proteinmenge entwickeln. Dies sind die Haupttypen der Elektrophorese:

1. Hämoglobinelektrophorese

Die Hämoglobinelektrophorese ist eine Labortechnik, die durchgeführt wird, um die verschiedenen Arten von Hämoglobin zu identifizieren, die im Blut zirkulieren, und die es ermöglicht, das Vorhandensein von Krankheiten im Zusammenhang mit der Hämoglobinsynthese zu identifizieren. Die Art des Hämoglobins wird mittels Elektrophorese bei einem spezifischen pH-Wert, idealerweise zwischen 8,0 und 9,0, mit einem Bandenmuster identifiziert, das mit dem normalen Muster verglichen werden kann, wodurch abnormale Hämoglobine identifiziert werden können.

Wofür es gemacht ist: Die Hämoglobinelektrophorese wird durchgeführt, um Krankheiten im Zusammenhang mit der Hämoglobinsynthese zu untersuchen und zu diagnostizieren, wie Sichelzellenanämie und Hämoglobin-C-Krankheit, und ist außerdem nützlich bei der Differenzierung von Thalassämie. Erfahren Sie, wie Sie die Hämoglobin-Elektrophorese interpretieren.

2. Proteinelektrophorese

Die Proteinelektrophorese ist eine vom Arzt angeforderte Untersuchung, um die Menge der im Blut zirkulierenden Proteine ​​zu bestimmen und damit Krankheiten zu identifizieren. Diese Untersuchung erfolgt aus einer Blutprobe, die zentrifugiert wird, um das Plasma zu erhalten, wobei der Teil des Blutes unter anderem aus Proteinen besteht.

Nach der Elektrophorese kann ein Bandenmuster sichtbar gemacht werden und anschließend ein Diagramm, in dem die Menge jeder Proteinfraktion angegeben ist, was für die Diagnose von grundlegender Bedeutung ist.

Wofür es gemacht ist: Die Proteinelektrophorese ermöglicht es dem Arzt, das Auftreten von multiplem Myelom, Dehydration, Zirrhose, Entzündung, Lebererkrankung, Pankreatitis, Lupus und Bluthochdruck anhand des im Untersuchungsbericht dargestellten Bandenmusters und der Grafik zu untersuchen.

Verstehen Sie, wie es gemacht wird und wie Sie das Ergebnis der Proteinelektrophorese verstehen.